光学显微镜的放大倍率的计算是目镜的放大倍率乘上物镜的放大倍率，若是使用立体显微镜，则还需再乘上镜身倍率，一般情况来说，放大总倍率较大可达1500倍，而物镜倍率较大则可达150倍，一些进阶品质的光学显微镜的放大倍率当然不只如此，但价格上的考量可能是各实验室需要考量的一个重要因素使得我们平常接触到的光学显微镜的极限并没有达到极致。

尽管物镜开口值决定了系统的解析度，明亮度等光学显微镜的重要参数，且通常越高倍率的物镜也拥有较高的开口值，似乎高倍率的物镜镜头便可让观察者观察到更微小的细节，但大倍率底下也意味着观察视野变小，集光力降低，让观察区域更显昏暗，此时即使物体的鑑别力提高了，但是想要看的细节却没办法凸显出来，此外承载仪器的基座的避震性要做得更好，否则微小的震动就会影响了观测品质，因此在利用光学显微镜做基本的观察时，并不是说越高倍率就越好，而是选择在适当的倍率底下做较佳化的观察，如果要做更高倍率的观察，则需利用电子显微镜才是较正确的方式。